串联三重四极杆液质联用仪


 基本信息:

生产厂家:美国 Agilent

型号:G6410

出厂日期:20070928

主要附件:Agilengt 1200 Series LC
Agilengt 6410 Triple Quad MS
电喷雾离子源(Electrospray IonizationESI

负责人:彭佳敏

放置地点:药学院128

联系电话:23506930

标准操作规程:

1. 开机前,根据需要选择合适的色谱柱;准备好样品,选择适当溶剂溶解(挥发性溶剂为佳);准备HPLC流动相(可含挥发性酸、碱或盐),水相放入A瓶,有机相放入B瓶。

2. 开机:输入大型仪器平台的账号和密码(一卡通账号和密码)进入实验界面,启动Data Acquisition,观察仪器状态和真空情况,待各个模块都ready后,系统才允许进样。

3. 建立分析方法:Sample模块输入样品基本信息;ALS模块输入自动进样器参数,建议设置带洗针的进样;Bin Pump模块输入泵参数,可建立梯度洗脱程序,设定流动相流速,比例,运行时间等;Column模块输入柱温箱温度;QQQ模块,注意选择合适的调谐文件;使用工具栏中的Save Method图标或者文件菜单保存方法。

4. 样品分析与采集:打开HPLC purge阀,冲出管路中气泡;开泵,平衡色谱柱,HPLC流路to waste20分钟后接入MS。待整个系统系统平衡(约30分钟),基线稳定后,点击Start,开始采集样品。

5. 报告输出:数据采集完毕后,进入Qualitative Data Analysis 即可进行数据分析;自行准备DVD盘,可进行数据及报告刻录。

6. 关机:冲洗色谱柱,清洗喷雾针;点击Standby;退出工作站,关闭整个系统;清洗离子源;退出大型仪器平台系统,提交仪器使用情况报告;在记录本上记录使用情况。

注意事项:

1. 所有的溶剂均选用HPLC级试剂。

2. 要避免使用非挥发性缓冲盐;表面活性剂,清洁剂和去污剂(会抑制离子化);以及无机酸等。流动相中如含有挥发性缓冲盐,必须用5%甲醇或5%乙腈过渡冲洗;水相流动相需经常更换,防止长菌变质。

3. ESI源来说,最佳工作流速为0.1-0.5mL/min,一般采用1.0-3.0mm内径的色谱柱,如果采用常规色谱柱或需增大流速,则需要分流。

4. ESI离子化与溶剂密切相关,需要注意:三氟乙酸(TFA)对ESI离子化有抑制效应;三乙胺(TEA)在m/z102处有较强的[M+H]+峰,有可能会抑制某些碱性化合物在ESI+条件下的离子化,也有可能会增强某些碱性化合物在ESI-条件下的响应。

5.连接HPLC泵,LC色谱柱等时,要将仪器置于standby状态。

6.流动相及样品均需过0.22μm 的微孔滤膜;样品尽量不要贮存在塑料离心管里。

代表性成果:

1. ActaScientiarumNaturaliumUniversitatisNankaiensis. 2010.43(4):29-35

2. Phytochemical Analysis. 2011,22(4):330-338

3. Chin Pharm J. 2012,47(1):61-64

4. Pharmazie. 2012,67(2):168-173

5. Biotechnology Letters. 2012,2:210-215